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原位杂交法是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,原位杂交公司,从而对特定核酸顺序进行定量定位的方法。原位杂交法可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。


原位杂交是一种生物学技术,它可以在细胞或组织中特定部位检测DNA或RNA的存在,而不需要将DNA或RNA分离出来。这项技术使用标记的DNA或RNA探针,与细胞或组织中的相应DNA或RNA进行特异性结合,原位杂交服务,然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。

原位杂交的原理很简单。DNA或RNA分子具有互补的核苷酸序列,因此可以通过氢键相互结合。将标记的DNA或RNA探针与细胞中的DNA或RNA进行杂交,可以特异性地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映DNA或RNA在细胞中的水平和分布。




 组织原位杂交(Tissue in situ hybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术

  原位杂交技术的基本原理

  利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,原位杂交,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。

  1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA双键分子

  2.应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P,荧光素、生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,荧光原位杂交,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交

  3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位

  用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。

  此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。


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